收藏本站
我的資料
我的訂單
  購物車(chē) (0)  
親,您的購物車(chē)空空的喲~
去購物車(chē)結算
   
查看手機網(wǎng)站
其他賬號登錄: 注冊 登錄
150-21460884
新聞詳情

豬膀胱平滑肌細胞原代細胞的分離培養

發(fā)表時(shí)間:2024-03-05 15:45

豬膀胱平滑肌細胞原代細胞的分離培養:


原代培養即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長(cháng)。原代培養的特點(diǎn)是細胞或組織剛離開(kāi)機體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內的狀態(tài),表現出來(lái)源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗,尤其是藥物對細胞活動(dòng)、結構、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養法有組織塊培養法和消化培養法。


(一)組織塊培養法


許多實(shí)驗室喜歡用組織塊培養法進(jìn)行原代培養,因為方法簡(jiǎn)單,細胞也較容易生長(cháng)。尤其是培養心肌,有時(shí)還可觀(guān)察到心肌組織塊搏動(dòng)。細胞從組織塊邊緣向外長(cháng)出并鋪滿(mǎn)培養皿或培養瓶后, 即可進(jìn)行傳代。


1. 設備材料


培養箱、冰箱、超凈工作臺/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養瓶、培養皿、消化液、基礎培養液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。


2. 操作步驟


(1) 在無(wú)菌條件下,取待培養的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。


(2)用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。


(3)再用Hanks 溶液反復漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。


(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養液。


(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養皿內表面,吸去多余的培養液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養皿蓋,做好標記, 置37°C 的CO2培養箱內。


(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養液少量,以使組織塊浸沒(méi)在培養液中。


(7)輕輕地將培養皿及組織塊移至CO2 培養箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀(guān)察。1~2 周后,可觀(guān)察到細胞從組織塊邊緣長(cháng)出,形成生長(cháng)暈。


(9) 一般說(shuō)來(lái),若培養液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長(cháng)滿(mǎn)整個(gè)培養皿內表面,即可進(jìn)行傳代培養。


分享到:
正品保障

確保所有產(chǎn)品都是原裝正品

優(yōu)質(zhì)服務(wù)

優(yōu)質(zhì)服務(wù),售后無(wú)憂(yōu)

安全包裝

統一包裝,保障產(chǎn)品安全運輸

正規發(fā)票

機打發(fā)票,附箱送達

    配送方式            新手入門(mén)           售后服務(wù)           幫助中心           支付方式           關(guān)于我們
      包裝說(shuō)明                會(huì )員服務(wù)                退款說(shuō)明                服務(wù)協(xié)議               預付賬戶(hù)               聯(lián)系一研
      商品驗收                積分規則               退換款地址            投訴建議                發(fā)票制度
      配送查詢(xún)                購物流程                退換款流程            聯(lián)系客服               付款周期
      配送說(shuō)明                會(huì )員體系                退換款原則            找回密碼               付款方式
手機掃一掃
訪(fǎng)問(wèn)手機網(wǎng)站